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抗體中熒光染色
熒光染色—工作原理
由于其獨特的電子構型,熒光物具有典型的吸收(激發(fā))和發(fā)射光譜。
單一染色在特定波長(cháng)被激發(fā),在另外一個(gè)波長(cháng)發(fā)射光子。復合染色由距離非常近的、能量可以在彼此之間傳遞的一個(gè)供體及一個(gè)受體熒光物分子所組成。復合染色在受體分子的激發(fā)波長(cháng)被激發(fā),在 供體分子的發(fā)射波長(cháng)發(fā)射一個(gè)光子。
激發(fā)和發(fā)射光譜圖
單一染色能量水平圖解
單一染色能量水平圖解
為染色而設置在激發(fā)波長(cháng)的激光為熒光物分子中的電子提供電磁能量。
電子在下一個(gè)能級(Es)躍遷至一個(gè)激發(fā)狀態(tài)。
能量被以光子(熒光)的形式釋放,電子移回至較低的能級(Gs)。
復合染色:5DA?45 在通過(guò)激光(圖示中 1-2)提供了能量的電子激發(fā)狀態(tài)下,能量被供體分子 中的一個(gè)電子釋放后,被受體分子 中的一個(gè)電子所吸收。 45
受體分子中的電子在下一個(gè)能級 (Es) 躍遷到激發(fā)狀態(tài),和單一染色一樣,能量被以光子(熒光)的形式所釋放,然后電子回到較低能級 (Gs) 的狀態(tài)
4.2 熒光染料表
核酸探針
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